本发明公开了出芽短梗霉氮响应转录因子Gat1及其应用,出芽短梗霉氮响应转录因子Gat1氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示,编码区序列如SEQ ID NO.4所示,基因组序列如SEQ ID NO.3所示;通过敲除和过表达出芽短梗霉氮响应转录因子Gat1发现,敲除后出芽短梗霉的生物量及代谢产物聚苹果酸均降低,而过表达后聚苹果酸产量得到提高,证明了出芽短梗霉氮响应转录因子Gat1参与调控聚苹果酸的合成,因此氮响应转录因子Gat1可用于提高出芽短梗霉的聚苹果酸产量,对进一步提高出芽短梗霉聚苹果酸产量具有重要意义。
本发明公开了一种出芽短梗霉UDPG焦磷酸酶、编码基因、载体及在提高出芽短梗霉胞外多糖产量中的应用,所述酶的氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示;本发明利用基因工程技术在出芽短梗霉原始菌中过表达UDPG焦磷酸酶,重组短梗霉普鲁兰多糖的产量能够提高32%,β-1,3葡聚糖产量能够提高55%;从分子角度证明UDPG焦磷酸酶参与两种胞外多糖的合成,为利用代谢工程技术改造出芽短梗霉的胞外多糖合成途径提供技术基础和方法指导
本发明公开了一种普鲁兰合成酶、编码基因、载体及提高出芽短梗霉胞外普鲁兰多糖产量中的应用,酶的氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示;首次使用基因工程技术敲除了出芽短梗霉中的普鲁兰合成酶,敲除菌株合成普鲁兰多糖的能力全部消除,说明普鲁兰合成酶在普鲁兰多糖合成过程中具有不可替代的作用;首次利用基因工程技术在出芽短梗霉原始菌中过表达普鲁兰合成酶,重组短梗霉摇瓶发酵普鲁兰多糖的产量能够提高44%。本发明为利用代谢工程技术改造出芽短梗霉的胞外普鲁兰多糖合成途径提供技术基础和方法指导。